| 突变人GM-CSF基因在大肠杆菌中的表达及纯化 |
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| 引用本文： | 马莉,白泉,王骊丽,耿信笃.突变人GM-CSF基因在大肠杆菌中的表达及纯化[J].西北大学学报,2006,36(1):63-67. |
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| 作者姓名： | 马莉 白泉 王骊丽 耿信笃 |
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| 作者单位： | 西北大学现代分离科学研究所/现代分离科学陕西省重点实验室 陕西西安710069 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(20175016) |
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| 摘 要： | 目的构建重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)的高效表达质粒,将其表达产物用于分离纯化的研究。方法用人外周血单核细胞获得总RNA作为模板和修饰的5′端密码子的引物经RT-PCR反应扩增到人GM-CSF基因,插入温控表达载体pDH构建了突变的hGM-CSF表达质粒,并将在E.coli中获得表达的突变rhGM-CSF包含体8 mol/L脲提取液进一步用离子交换色谱柱分离纯化。结果rhGM-CSF在大肠杆菌表达占菌体总蛋白量的22%,用弱阴离子交换色谱对rhGM-CSF的工程菌表达产物8 mol/L脲提取液直接经35 m in分离纯化,所得产物纯度可达95%,质量回收率可达到60%。结论这表明用离子交换色谱可进行rhGM-CSF的复性与同时纯化。
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| 关 键 词： | 重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 表达 大肠杆菌 离子交换色谱 分离纯化 |
| 文章编号： | 1000-274X（2006）01-0063-05 |
| 收稿时间： | 2005-04-01 |
| 修稿时间： | 2005年4月1日 |
The expression and purification of mutant hGM-CSF gene in E.coli |
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| MA Li,BAI Quan,WANG Li-li,GENG Xin-du.The expression and purification of mutant hGM-CSF gene in E.coli[J].Journal of Northwest University(Natural Science Edition),2006,36(1):63-67. |
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| Authors: | MA Li BAI Quan WANG Li-li GENG Xin-du |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | rhGM-CSF expression E coli weak anion exchange chromatography purification |
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