| 猪瘟病毒NS3蛋白的原核表达纯化和抗体制备 |
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| 引用本文： | 方改霞,温国元,罗雪莲,凌大伟,潘兹书.猪瘟病毒NS3蛋白的原核表达纯化和抗体制备[J].武汉大学学报(理学版),2008,54(6). |
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| 作者姓名： | 方改霞 温国元 罗雪莲 凌大伟 潘兹书 |
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| 基金项目： | 湖北省科技厅科技攻关项目
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| 摘 要： | 以猪瘟病毒(CSFV)石门株全长cDNA克隆pT7SM为模板,PCR扩增CSFV ns3基因N末端截短的cDNA片段.PCR产物经限制性内切酶BglⅡ和SalⅠ双酶切消化后,克隆到经BamHⅠ和SalⅠ双酶切消化的pET-28a表达载体,构建重组质粒pET-ΔNS3,转化E.coli BL21-codonPlus (DE3),IPTG诱导重组蛋白表达.采用SDS-PAGE分离纯化非结构蛋白3(NS3)重组蛋白,免疫家兔,制备多克隆抗体.ELISA法及间接免疫荧光检测结果显示,该多克隆抗体效价在1×105以上,能分别与在大肠杆菌中表达的NS3重组蛋白或CSFV感染细胞中表达的NS3天然蛋白发生特异性结合反应.制备的NS3重组蛋白可用作建立NS3抗体ELISA检测方法的包被抗原 ;NS3抗体可用于检测CSFV病毒感染和NS3功能研究中的蛋白质鉴定.
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| 关 键 词： | 猪瘟病毒 非结构蛋白3(NS3) 多克隆抗体 |
Expression of the Nonstructural Protein 3 (NS3) of Classical Swine Fever Virus (CSFV) in E.coli and Production of Polyclonal Antibody against NS3 |
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| FANG Gaixia,WEN Guoyuan,LUO Xuelian,LING Dawei,PAN Zishu.Expression of the Nonstructural Protein 3 (NS3) of Classical Swine Fever Virus (CSFV) in E.coli and Production of Polyclonal Antibody against NS3[J].JOurnal of Wuhan University:Natural Science Edition,2008,54(6). |
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| Authors: | FANG Gaixia WEN Guoyuan LUO Xuelian LING Dawei PAN Zishu |
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