| 用硫酸软骨素A作探针共振瑞利散射及共振非线性散射法测定蛋白质 |
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| 引用本文： | 刘健,刘忠芳,胡小莉,孔玲,刘绍璞.用硫酸软骨素A作探针共振瑞利散射及共振非线性散射法测定蛋白质[J].化学学报,2010,68(12):1210-1216. |
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| 作者姓名： | 刘健 刘忠芳 胡小莉 孔玲 刘绍璞 |
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| 作者单位： | 西南大学化学化工学院 发光与实时分析教育部重点实验室 重庆 400715 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，发光与实时分析教育部重点实验室资助项目 |
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| 摘 要： | 在pH 1.8～2.5的Britton-Robinson (BR)缓冲介质中, 硫酸软骨素A (CSA)的硫酸酯基离解而以带多个负电荷的大阴离子存在, 而人血清白蛋白(HSA)、牛血清白蛋白(BSA)、糜蛋白酶(Chy)、溶菌酶(Lyso)和α-淀粉酶(α-Amy)等蛋白质处于其等电点(pI)之下, 则是带多个正电荷的大阳离子, 两者可借静电引力、氢键作用、疏水作用而结合形成复合物. 此时将引起共振瑞利散射(RRS)和二级散射(SOS)、倍频散射(FDS)等共振非线性散射(RNLS)的显著增强并出现新的散射光谱. 3种散射的散射增强(ΔIRRS, ΔISOS和ΔIFDS)均在一定范围内与蛋白质的浓度成正比, 方法具有高灵敏度. 三种方法对蛋白质的检出限分别为4.5～12.0 (g/L (RRS法)、8.9～15.8 (g/L (SOS法)和13.4～31.5 (g/L (FDS法), 其中以CSA-BSA体系灵敏度最高(检出限可达4.5 (g/L). 研究了反应体系的RRS, SOS和FDS的光谱特征、适宜的反应条件和影响因素, 讨论了反应机理、结合模式以及散射增强的原因. 并以CSA-BSA体系为例考察了共存物质的影响, 表明方法有良好的选择性. 方法可用于正常人血清及尿样中蛋白质的测定.
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| 关 键 词： | 硫酸软骨素A 蛋白质 共振瑞利散射 二级散射 倍频散射 |
Determination of Proteins by Resonance Rayleigh Scattering and Resonance Non-linear Scattering Methods with Chondroitin Sulfate A as Probe |
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| Liu Jian,Liu Zhongfang,Hu Xiaoli,Kong Ling,Liu Shaopu.Determination of Proteins by Resonance Rayleigh Scattering and Resonance Non-linear Scattering Methods with Chondroitin Sulfate A as Probe[J].Acta Chimica Sinica,2010,68(12):1210-1216. |
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| Authors: | Liu Jian Liu Zhongfang Hu Xiaoli Kong Ling Liu Shaopu |
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| Institution: | Key Laboratory on Luminescence and Real-Time Analysis, Ministry of Education, School of Chemistry and Chemical Engineering, Southwest University, Chongqing 400715 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | chondroitin sulfate A protein resonance Rayleigh scattering second order scattering frequency doubling scattering |
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