| pEGFP-Egr-1表达质粒构建及其表达抑制HepG2细胞增殖 |
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| 引用本文： | 黄心怡,虞游,金韵特,陈建明.pEGFP-Egr-1表达质粒构建及其表达抑制HepG2细胞增殖[J].杭州师范大学学报(自然科学版),2016(4):382-386. |
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| 作者姓名： | 黄心怡 虞游 金韵特 陈建明 |
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| 作者单位： | 杭州师范大学生命与环境科学学院 |
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| 基金项目： | 杭州市社会发展自主申报项目(20160533B01);国家级大学生创新创业训练计划项目(201510346019) |
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| 摘 要： | 将RT-PCR扩增的Egr-1基因连接到pMD-18载体上并测序鉴定,经测序正确的Egr-1基因亚克隆到绿色荧光蛋白真核表达载体pEGFP-C1上构建成重组质粒pEGFP-Egr-1.重组质粒pEGFP-Egr-1转染HepG2细胞后,运用荧光显微镜及荧光定量PCR技术分析其在HepG2细胞中的表达情况,并进一步运用WST-1法分析其表达对HepG2细胞增殖的影响.结果显示,重组质粒pEGFP-Egr-1构建正确,转染后在荧光显微镜下观察可见HepG2细胞发出绿色荧光信号,荧光定量PCR分析发现转染后HepG2细胞Egr-1基因mRNA水平明显升高.WST-1结果表明,与对照组相比,转染pEGFP-Egr-1质粒的HepG2细胞,其增殖速率明显下降.上述结果表明,pEGFP-Egr-1重组质粒构建成功,外来过表达Egr-1基因能够抑制HepG2细胞增殖.
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| 关 键 词： | Egr-1基因 pEGFP-Egr-1表达质粒 HepG2细胞 细胞增殖 |
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