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基质辅助激光解析电离质谱用于多肽和蛋白质亚硝基化修饰研究
引用本文:曹冬,张养军,韩春光,邓玉林,钱小红.基质辅助激光解析电离质谱用于多肽和蛋白质亚硝基化修饰研究[J].分析化学,2009,37(1).
作者姓名:曹冬  张养军  韩春光  邓玉林  钱小红
作者单位:1. 北京理工大学生命科学与技术学院,北京,10008;1北京放射医学研究所蛋白质组学国家重点实验室-北京蛋白质组研究中心,北京,102206
2. 北京放射医学研究所蛋白质组学国家重点实验室-北京蛋白质组研究中心,北京,102206
3. 北京理工大学生命科学与技术学院,北京,100081
4. 北京理工大学生命科学与技术学院,北京,100081;北京放射医学研究所蛋白质组学国家重点实验室-北京蛋白质组研究中心,北京,102206
基金项目:国家自然科学基金,国家高技术研究发展计划(863计划) 
摘    要:亚硝基阴离子是生物体内重要的生物调控小分子,广泛分布于生物体的血液和组织中,能使蛋白质发生硝基化和亚硝基化修饰,并且调控生物体的多种生理过程.本研究应用高灵敏度的基质辅助激光解析电离-飞行时间串联质谱(MALDI-TOF-MS)技术,以合成的标准肽段和肌红蛋白为模型系统.研究了蛋白质和多肽主链N端氨基与赖氨酸侧链氨基对HNO2反应的敏感性,并考察了反应体系和不同的反应时间对HNO2与多肽的反应完全程度的影响.结果表明,HNO2能与肽段N端的伯氨基发生重氮化反应,形成的叠氮化中间产物不稳定,放出氮气形成碳正离子,碳正离子可进一步发生取代或消除反应.发生取代反应,水溶液中的羟基取代N-末端氨基形成M+1产物,既使得产物比原肽段分子量多1 Da;发生消除反应,脱掉1分子的氨,又生成M-17烯烃衍生物,从而使产物比原肽段分子量少17 Da.当采用1 mol/L乙酸和1 mol/L的亚硝酸钠作为反应体系时,反应5 min, 肽段的N端氨基即可完全与HNO2反应生成羟基取代产物和烯烃衍生物.而在上述条件下,未发现赖氨酸侧链氨基与HNO2反应,说明HNO2主要与肽段和蛋白的N端氨基发生反应.

关 键 词:基质辅助激光解析电离飞行时间质谱  蛋白质  亚硝化

Study on the Nitrosation of Peptide and Proteins with Nitrous Acid Using Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization-Time of Flight-Mass Spectrometry
CAO Dong,ZHANG Yang-Jun,HAN Chun-Guang,DENG Yun-Lin,QIAN Xiao-Hong.Study on the Nitrosation of Peptide and Proteins with Nitrous Acid Using Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization-Time of Flight-Mass Spectrometry[J].Chinese Journal of Analytical Chemistry,2009,37(1).
Authors:CAO Dong  ZHANG Yang-Jun  HAN Chun-Guang  DENG Yun-Lin  QIAN Xiao-Hong
Institution:School of Life Science and Technology;University of Beijing Institute of Technology;Beijing 100081;State Key Laboratory of Proteomics-Beijing Proteome Research Center-Beijing Institute of Radiation Medicine;Beijing 102206
Abstract:
Keywords:Matrix assisted laser desorption/ionization-time of flight-mass spectrometry  protein  nitrosation  
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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