| 超高效液相色谱-串联质谱法同时测定肿瘤细胞mRNA中12种正常核苷和修饰核苷 |
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| 引用本文： | 罗阳旭,戴开金,杜娟,肖华弟,郑玲,陈训财,马安德,罗奇志. 超高效液相色谱-串联质谱法同时测定肿瘤细胞mRNA中12种正常核苷和修饰核苷[J]. 分析测试学报, 2020, 39(8): 950-960 |
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| 作者姓名： | 罗阳旭 戴开金 杜娟 肖华弟 郑玲 陈训财 马安德 罗奇志 |
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| 作者单位： | 1.南方医科大学公共卫生学院卫生检测中心；2.南方医科大学广东南方医大科技开发有限公司;3.南方医科大学司治鉴定中心;4.南方医科大学法医学院法医毒物学系 |
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| 基金项目： | Project on the Integration of Industry,Education and Research of Guangdong Province(2012B091100371) |
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| 摘 要： | 建立了一种肿瘤细胞mRNA中12种正常核苷和修饰核苷的分析方法。肿瘤细胞样品经总RNA提取、mRNA纯化和mRNA水解后，加入8-溴鸟苷(8Br-G)为内标，以0.1%甲酸水溶液和0.1%甲酸甲醇溶液为流动相，采用Agilent RRHD SB-C18(2.1 mm×50 mm，1.8 μm)色谱柱进行分离，电喷雾电离源正离子扫描(ESI+)，多反应监测(MRM)模式检测。该方法符合方法学验证要求，12种正常核苷和修饰核苷在一定浓度范围内线性关系良好，相关系数(r)均大于0.99，定量下限(LOQ)为0.17~3.13 ng/mL，检出限(LOD)为0.08~1.56 ng/mL。将建立的方法应用于人鼻咽癌5-8F细胞系、人宫颈癌Hela细胞系和人胚肾上皮293T细胞系，成功地检测出多种修饰核苷水平。该方法细胞用量少(每样品2×106个)，分析时间短(每样品6 min)，灵敏度高，可为癌症研究和临床诊断等提供一种有效的分析方法。
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| 关 键 词： | 核苷；修饰核苷；mRNA；肿瘤细胞；超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS) |
Simultaneous Determination of Twelve Normal and Modified Nucleosides in mRNA of Cancer Cells by Ultra high Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry |
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| LUO Yang-xu,DAI Kai-jin,DU Juan,XIAO Hua-di,ZHENG Ling,CHEN Xun-cai,MA An-de,LUO Qi-zhi. Simultaneous Determination of Twelve Normal and Modified Nucleosides in mRNA of Cancer Cells by Ultra high Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry[J]. Journal of Instrumental Analysis, 2020, 39(8): 950-960 |
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| Authors: | LUO Yang-xu DAI Kai-jin DU Juan XIAO Hua-di ZHENG Ling CHEN Xun-cai MA An-de LUO Qi-zhi |
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| Affiliation: | 1.Hygiene Detection Center,School of Public Health,Southern Medical University;2.Guangdong Southern Medical University Technology Development Department CO.,Ltd.,Southern Medical University;3.Forensic Science Center,Southern Medical University;4.Department of Forensic Toxicology,School of Forensic Medicine,Southern Medical University |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | nucleoside RNA modification mRNA cancer cell ultra high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry(UPLC-MS/MS) |
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