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人丙型肝炎病毒核心抗原基因的表达和纯化
引用本文:叶林柏,郜金荣,孟小林,徐进平,胡敏,马凯,吴正辉,叶璨樱.人丙型肝炎病毒核心抗原基因的表达和纯化[J].武汉大学学报(理学版),1996(6).
作者姓名:叶林柏  郜金荣  孟小林  徐进平  胡敏  马凯  吴正辉  叶璨樱
作者单位:武汉大学生命科学学院
基金项目:湖北省科学技术委员会重点项目资助
摘    要:人丙型肝炎病毒I型(HCV-I)核心抗原编码区cDNA,全长573bp,编码191个氨基酸,被克隆到一种新的表达质粒pRSETHisB中,转化大肠菌BL21菌株,在1mmolL-1IPTG诱导37℃培养5h,核心抗原表达水平达到高峰,表达出分子量26×103的融合蛋白,并在细胞内形成微小晶体.表达水平达到细胞总蛋白的40%左右,通过纯化,获得的核心抗原经SDS-PAGE检查为均一分子量26×103的蛋白,用酶联免疫法进行血清学初步检查,纯化的核心抗原与HCV阳性血清显示出强烈的阳性反应,对慢性丙肝病人血清中抗HCV抗体的阳性检出率达93%,而与正常人血清则无阳性反应

关 键 词:HCV核心抗原,表达,纯化,血清学反应
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