羧甲基D-甘油醛-3-磷酸脱氢酶光照产生新荧光物质的研究——十二烷基硫酸钠的影响

对于甘油醛-3-磷酸脱氢酶,无论是酶朊、羧甲基化酶朊,或经光照产生新荧光物的光照酶,在加入十二烷基硫酸钠(SDS)并扫描差吸收光谱时,均产生295nm及288nm两个负峰以及267nm的正峰,同样SDS也引起酶朊和羰甲基化酶朊的蛋白荧光淬灭,这些无疑都是由于原来位于酶蛋白内部非极性环境的色氨酸及酪氨酸残基转移到分子外部极性环境所致。新荧光物的形成对SDS非常敏感,在光照前加入SDS使其与酶的重量比为0.5时新峰的形成已经大为减弱,但与此同时其蛋白荧光却比上述对照样品为高,SDS对已经形成的荧光新峰的强度也有影响,但需要更多的SDS才能使新峰荧光强度有较明显的下降,在SDS与酶的比值约为0.5时,新峰荧光强度下降还不明显,但蛋白荧光强度却反而略有增加,这些结果表明,在酶分子内部的色氨酸侧链、NAD⁺以及活性部位巯基上的羰甲基之间的空间关系受到SDS破坏时,形成新荧光物的光化学反应就不能进行,在新荧光物形成之后,它与色氨酸之间的能量转移关系,也同样是对SDS敏感的。