基于表面增强拉曼光谱的碱性磷酸酶活性检测方法研究

碱性磷酸酶(ALP)是一种重要的酶类生物标志物,其非正常表达与肝功能紊乱、骨病等疾病联系紧密。本研究建立了一种基于表面增强拉曼光谱(SERS)的ALP活性检测新方法,该方法合成了探针分子B-MDP,并利用探针分子磷酸根可被ALP催化水解为酚羟基从而引起SERS谱图明显变化的机制,完成ALP活性的分析检测。得益于SERS技术能够提供分子指纹谱图以及催化反应特异性的复合优点,B-MDP对ALP具有高选择性;同时,该方法可在ALP活性为0.01～0.5 mU/mL和0.5～10 mU/mL范围内呈现良好的线性关系,检出限为3μU/mL。此外,该方法对血清样品中ALP的加标回收率为98.98%～109.74%,利用该方法也可进行Na_3VO_4对ALP活性的抑制能力评估。结果表明,该方法选择性好、灵敏度高、线性范围宽,可为ALP相关疾病的诊断及其抑制剂筛选提供新的分析方法参考。