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应用毒理蛋白质组学技术研究多环芳烃类物质诱导气道上皮细胞毒理作用的机制
引用本文:闵凌峰,何淑雅,陈琼,谢明萱,彭红兵,曹兰玉,王怀石,朱小燕.应用毒理蛋白质组学技术研究多环芳烃类物质诱导气道上皮细胞毒理作用的机制[J].化学学报,2011,69(21):2609-2617.
作者姓名:闵凌峰  何淑雅  陈琼  谢明萱  彭红兵  曹兰玉  王怀石  朱小燕
作者单位:(1中南大学湘雅医院老年医学科、呼吸内科 长沙 410008) (2南华大学生物化学与分子生物学系 衡阳 421001)
基金项目:国家自然科学基金,湖南省自然科学基金,湖南长沙市环境保护局专项资金
摘    要:为了更好地理解苯并芘(Benzo(a)pyrene, B(a)P)在气道细胞诱导的毒理作用机制. 应用二维凝胶电泳(two-dimensional electrophoresis, 2-DE)分离B(a)P处理组(B(a)P-A549)、对照组(DMSO-A549)的总蛋白质, 图像分析识别差异表达的蛋白质点, 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定差异蛋白质点, Western blot验证差异蛋白热激蛋白27 (heat shock protein 27, HSP 27)以及锰超氧化物歧化酶(Mn superoxide dismutase, Mn SOD)的表达, 使用0.1, 1, 10 μmol/L B(a)P处理A549细胞, 应用Western blot及RT-PCR检测各组细胞中Mn SOD的表达, 检测各组细胞中总抗氧化活性(total antioxidant capacity)、总SOD活性(total activity of SOD)、过氧化氢酶活性(catalase activity, CAT)、谷胱甘肽还原酶活性(glutathione reductase, Gr). 本研究首先建立了B(a)P处理组、对照组的2-DE 图谱, 质谱鉴定了23个差异蛋白质, Western blot 证实HSP 27及Mn SOD的表达水平在B(a)P处理组中较对照组明显下调|使用0.1, 1, 10 μmol/L B(a)P处理A549细胞后, 发现随着B(a)P的浓度升高, 虽然Mn SOD的表达及SOD活性出现先诱导后抑制的现象, 但CAT及Gr活性的增高依然提高了机体的总抗氧化活性. 研究结果提示: HSP 27及Mn SOD 与B(a)P在气道细胞诱导的毒理作用相关, CAT及Gr在对抗B(a)P带来的氧化损伤方面可能具有十分重要的作用.

关 键 词:苯并芘  气道上皮细胞  蛋白质组学  HSP27  MnSOD  

Using Proteomic Analysis to Screen for Differentially Expressed Proteins in Airway Epithelial Cells Toxicity Mediated by Polycyclic Aromatic Hydrocarbons
MIN Ling-Feng,HE Shu-Ya,CHEN Qiong,XIE Ming-Xuan,PENG Hong-Bing,CAO Lan-Yu,WANG Huai-Shi,ZHU Xiao-Yan.Using Proteomic Analysis to Screen for Differentially Expressed Proteins in Airway Epithelial Cells Toxicity Mediated by Polycyclic Aromatic Hydrocarbons[J].Acta Chimica Sinica,2011,69(21):2609-2617.
Authors:MIN Ling-Feng  HE Shu-Ya  CHEN Qiong  XIE Ming-Xuan  PENG Hong-Bing  CAO Lan-Yu  WANG Huai-Shi  ZHU Xiao-Yan
Institution:(1 Department of Respiratory, Department of Geriatric Medicine, Xiangya Hospital of Central South University, Changsha 410008) (2 Department of Biochemistry and Molecular Biology, University of South China, Hengyang 421001)
Abstract:
Keywords:PAHs  airway epithelial cells  proteomics  HSP 27  Mn SOD
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