牛奶α-乳白蛋白基因实时荧光定量PCR检测方法的建立 |
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作者姓名: | 贾敏 张亦凡 张银志 孙秀兰 |
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作者单位: | 1. 江南大学食品学院,江苏无锡,214122 2. 陕西省汉中市产品质量监督检验所,陕西汉中,723000 3. 江南大学食品科学与技术国家重点实验室,江苏无锡,214122 4. 江南大学食品学院,江苏无锡214122;江南大学食品科学与技术国家重点实验室,江苏无锡214122 |
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摘 要: | 采用Taqman探针技术,建立食品中牛奶过敏原α-乳白蛋白基因的实时荧光定量PCR检测方法。根据α-乳白蛋白基因序列设计特异性引物及Taqman探针进行PCR扩增,构建质粒,经酶切鉴定测序后,建立拷贝数(copies)-Ct标准曲线。成功克隆α-乳白蛋白目的基因,建立的标准曲线在1.12×103~1.12×108 copies范围内线性关系良好,灵敏度高,液体样品检测限达到1 000copies/mL,特异性强,稳定性好。该法可用于实际商品中牛奶过敏原α-乳白蛋白组分的定量检测。
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关 键 词: | 牛奶 α-乳白蛋白 Taqman实时荧光定量PCR |
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