| 猪IL-18成熟蛋白在大肠杆菌中的表达及生物学活性鉴定 |
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| 引用本文： | 陈红英,郑兰兰,金钺,李新生,段廷云,崔保安.猪IL-18成熟蛋白在大肠杆菌中的表达及生物学活性鉴定[J].分子科学学报,2009,25(4). |
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| 作者姓名： | 陈红英 郑兰兰 金钺 李新生 段廷云 崔保安 |
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| 作者单位： | 1. 河南农业大学牧医工程学院,河南,郑州,450002
2. 漯河出入境检验检疫局,河南,漯河,462000 |
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| 基金项目： | 国家"十一五"科技支撑计划专项资助 |
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| 摘 要： | 以含猪IL-18全基因的重组质粒pGEM-IL-18为模板,PCR扩增猪IL-18成熟蛋白基因.将IL-18成熟蛋白片段定向插入原核表达载体pET-28a(+)中,构建重组表达质粒pET-IL-18,转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下表达融合蛋白(His-IL-18),并进行融合蛋白的纯化、生物学活性鉴定.结果表明,SDS-PAGE可检测到相对分子质量约为2.1×104的融合蛋白,westem blot证实His-IL-18能与猪IL-18单克隆抗体发生特异性反应.重组猪IL-18经纯化后,能明显刺激猪脾脏T淋巴细胞增殖反应,在Marc-145细胞上抗猪繁殖与呼吸综合征病毒的活性为2.50×103IU/mg,在PK-15细胞上抗猪伪狂犬病毒、猪细小病毒的活性分别为2.00×103和2.24×103IU/mg.表明建立的表达系统能够表达重组猪IL-18,表达的重组猪IL-18具有一定的生物学活性.
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| 关 键 词： | 猪IL-18 原核表达 生物学活性 抗病毒活性 |
Expression of porcine IL-18 mature protein in Escherichia coli and identification of its bioactivity |
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| CHEN Hong-ying,ZHENG Lan-lan,JIN Yue,LI Xin-sheng,DUAN Ting-yun,CUI Bao-an.Expression of porcine IL-18 mature protein in Escherichia coli and identification of its bioactivity[J].Journal of Molecular Science,2009,25(4). |
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| Authors: | CHEN Hong-ying ZHENG Lan-lan JIN Yue LI Xin-sheng DUAN Ting-yun CUI Bao-an |
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| Institution: | 1.College of Animal Husbandry and Veterinary;Henan Agricultural University;Zhengzhou 450002;China;2.Luohe Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau;Luohe 462000;China |
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| Abstract: | Porcine IL-18 mature protein gene was amplified with recombination plasmid pGEM-IL-18 as template and inserted into prokaryotic expression vector pET-28a(+) to generate a recombinant plasmid pET-IL-18.pET-IL-18 was transformed into E.coli BL21(DE3),which can express fusion protein in E.coli BL21(DE3) by IPTG inducing.The expressed product was identified by SDS-PAGE and Western blot.After purification,the bioactivity of recombinant porcine IL-18 was identified by recombinant porcine interleukin-18 on lymphoc... |
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| Keywords: | porcine interleukin-18 prokaryotic expression bioactivity anitviral activity |
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