H2O2-OPD-Fe2+体系催化荧光光度法测定过氧化氢酶活性

基于H₂O₂-OPD-Fe²⁺荧光释放体系构建测定过氧化氢酶活性的方法。在含TritonX-100的乙酸盐缓冲溶液中，Fe²⁺催化过氧化氢氧化邻苯二胺(OPD)的产物2,3-二氨基吩嗪(DAP)有荧光信号，在一定的实验条件下，该产物的荧光强度与过氧化氢浓度成正比，过氧化氢酶可以部分清除过氧化氢，从而使其荧光强度减弱，因此，酶作用前后荧光强度变化决定了过氧化氢酶活性。过氧化氢酶活性的线性范围为2.00×10^-4～1.60×10^-2 U·mL^-1,线性相关系数r=0.9962,最低检出下限可达5.95×10^-6 U·mL^-1。方法在血清过氧化氢酶活性检测中得到应用。