异亮氨酸拉链结构对可溶性CD40L生物学活性的影响 |
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引用本文: | 丁天,洪洁,徐颖,周璇,江培翃,钱志康,张学光,黄伟达.异亮氨酸拉链结构对可溶性CD40L生物学活性的影响[J].复旦学报(自然科学版),2003,42(4):564-569,575. |
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作者姓名: | 丁天 洪洁 徐颖 周璇 江培翃 钱志康 张学光 黄伟达 |
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作者单位: | 1. 复旦大学,生命科学学院,生物化学系,上海,200433 2. 苏州大学,医学生物技术研究所,苏州,215007 |
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摘 要: | CD40配基(CD40L)为TNF超家族中的一员,瞬时表达于激活的CD4^ 的T淋巴细胞上.自然状态下膜上三聚体的CD40L通过和CD40受体(CD40R)结合,在免疫监视和肿瘤免疫中发挥作用.以PCR方法从peDNA3-CD40L质粒上扩增得到编码CD40L基因的胞外部分sCD40L,并将该片段插入大肠杆菌表达质粒pET30a上,构建得到大肠杆菌表达质粒pET30a-sCD40L;同时,在sCD40L的N端融合了异亮氨酸拉链(Isoleucine Zipper,IZ)结构,构建得到表达质粒pET30a-IZ-sCD40L.表达质粒在大肠杆菌中表达,得到可溶性的重组人CD40L和IZ-CD40L.SDS-PAGE分析结果表明重组人rhsCD40L和IZ-rhsCD40L在相应分子质量位置都有明显的条带产生,并得到Western blotting的确认.非SDS-PAGE电泳结果显示,异亮氨酸拉链结构有利于rhsCD40L蛋白形成聚合体结构.B细胞增殖实验和人骨髓瘤细胞株XG2凋亡实验结果都表明,异亮氨酸拉链结构提高了rhsCD40L的生物学活性.
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关 键 词: | 可溶性CD40L 异亮氨酸拉链结构 表达 生物学活性 |
文章编号: | 0427-7104(2003)04-0564-06 |
Effect of Isoleucine Zipper Motif on the Biological Activity of Human Soluble CD40L |
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Abstract: | |
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Keywords: | soluble CD40L isoleucine zipper motif expression biological function |
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