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枯草芽孢杆菌6-磷酸葡萄糖脱氢酶的纯化及性质
引用本文:莫宏春,刘克武,孟延发,江琰,秦岭,宋贤丽. 枯草芽孢杆菌6-磷酸葡萄糖脱氢酶的纯化及性质[J]. 化学研究与应用, 2003, 15(3): 348-350
作者姓名:莫宏春  刘克武  孟延发  江琰  秦岭  宋贤丽
作者单位:四川大学生命科学学院,四川,成都,610064;四川大学生命科学学院,四川,成都,610064;四川大学生命科学学院,四川,成都,610064;四川大学生命科学学院,四川,成都,610064;四川大学生命科学学院,四川,成都,610064;四川大学生命科学学院,四川,成都,610064
摘    要:枯草芽孢杆菌通过超声破壁,(NH4)2SO4分段盐析,DEAE SepharoseFF离子交换层析,Blue SepharoseCL 6B亲和层析,SephadexG 200凝胶过滤等纯化步骤,分离出6 磷酸葡萄糖脱氢酶。经PAGE和SDS PAGE检测为单一蛋白区带,比活1 7375IU/mg,纯化倍数72 7,收率13 6%。凝胶过滤法测定表观分子量220KD,SDS PAGE测定亚基分子量50 5KD,可见该酶是由四个相同亚基构成的四聚体。测定最适pH、温度分别为8 5,37℃,底物G6P的Km值0 177mmol·L-1。考察了部分金属离子及EDPA对该酶活性、紫外、荧光光谱的影响。

关 键 词:枯草芽孢杆菌  6-磷酸葡萄糖脱氢酶  纯化  荧光光谱
文章编号:1004-1656(2003)03-0348-03
修稿时间:2002-10-06

Purification and characterization of G6PD From B.Subtilis
Abstract:
Keywords:bacillus subtilis  G6PD  purification  fluorescent spectra
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