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| 烟叶中曲霉菌含量的荧光定量PCR检测方法的建立及应用 | |
| 作者姓名： | 潘晓薇 王予 欧阳璐斯 陶红 周瑢 彭琛 |
| 作者单位： | 广东中烟工业有限责任公司技术中心 |
| 摘 要： | 为快速准确地对仓储烟叶中的曲霉菌含量进行测定,通过对几种曲霉菌的ITS区基因序列比对找出曲霉菌属遗传保守序列,以此为靶序列设计特异性引物及Taqman探针,构建烟曲霉基因序列重组质粒为阳性标准品,并绘制标准曲线,建立了烟叶中曲霉菌含量荧光定量PCR检测方法并验证该方法具有较好的特异性、灵敏度及重复性.利用此方法对模拟霉变烟叶进行跟踪检测,结果表明：当烟叶中曲霉菌基因拷贝数在109～1011copies·g-1之间时,烟叶处于临近霉变的状态;大于1011copies·g-1时烟叶为霉变状态;小于109copies·g-1时烟叶则为未霉变状态.该研究以期为仓储烟叶的霉变情况监控提供了一种更为高效灵敏的检测方法. |
| 关 键 词： | 曲霉菌 荧光定量PCR 烟叶 ITS Taqman探针 |