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基于四极杆-飞行时间质谱的非标记蛋白定量检测方法学研究
引用本文:王珊珊,赵汝松,苑金鹏,赵金. 基于四极杆-飞行时间质谱的非标记蛋白定量检测方法学研究[J]. 分析测试学报, 2012, 31(8): 928-932
作者姓名:王珊珊  赵汝松  苑金鹏  赵金
作者单位:山东省分析测试中心山东省大型精密仪器应用技术重点实验室,山东济南,250014
基金项目:国家科技支撑计划项目(2008BAK41B01);山东省科学院科技发展计划项目(科基合字2010第19号)
摘    要:以四极杆飞行时间质谱检测的蛋白肽段的质谱信息为基础,开发了一种简单、准确的蛋白定性、定量检测方法,并用于牛血清白蛋白的定性、定量检测。对酶解肽段的梯度洗脱条件和流速等液相色谱条件进行了优化;进行蛋白样品的酶解及质谱检测,利用MassHunter定量软件对数据进行分析;为减少假阳性结果的出现,实验优化了数据处理软件中的设置参数,并对方法的重现性进行了考察。结果显示,重复检测的8个肽段峰面积的RSD均在3.0%以下。该方法对牛血清白蛋白的检出限为100 ng。实验发现,样品中蛋白的含量与检测到的肽段匹配率呈对数关系,并从检测到的丰度较高的8个肽段中确定可用于BSA蛋白定性检测的肽段为:HLVDEPQNLIK,定量检测的肽段为:ATEEQLK,方法的回收率为106%。该方法操作简便,检测快速,成本较低,专一性强,可用于蛋白特异性肽段的筛选及复杂生物样品中蛋白的检测。

关 键 词:四极杆-飞行时间质谱  非标记定量检测  牛血清白蛋白

Label-free Quantitation of Protein Based on Quadrupole-time of Flight Tandem Mass Spectrometry
WANG Shan-shan , ZHAO Ru-song , YUAN Jin-peng , ZHAO Jin. Label-free Quantitation of Protein Based on Quadrupole-time of Flight Tandem Mass Spectrometry[J]. Journal of Instrumental Analysis, 2012, 31(8): 928-932
Authors:WANG Shan-shan    ZHAO Ru-song    YUAN Jin-peng    ZHAO Jin
Affiliation:(Analysis and Test Center,Key Laboratory for Applied Technology of Sophisticated Analytical Instruments of Shandong Province,Shandong Academy of Sciences,Jinan 250014,China)
Abstract:
Keywords:
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