枯草杆菌α－淀粉酶在色谱介质上的热变性行为研究

通过用前沿分析测定热力学参数的方法，研究了枯草杆菌α－淀粉酶在几种色谱介质上的热变性行为。实验结果表明，在RP-C18反相介质、Zn2+螯合的Chelating Sepharose Fast-Flow亲和介质和WCX-1阳离子交换介质上，当温度分别低于或超过30℃时，α－淀粉酶分子分别以一种稳定的构象存在；而在PEG-400 和修饰的PEG-400疏水色谱介质上，当温度分别低于40℃和30℃时，α－淀粉酶分子分别以一种稳定的构象存在，但当温度分别高于40℃和30℃时，α－淀粉酶分子的构象会发生剧烈的变化。同时，通过测定α－淀粉酶分子在自由溶液以及在PEG-400 和修饰的PEG-400疏水色谱介质上的热失活曲线，可以得出结论：在液相色谱过程中，色谱介质会诱导α－淀粉酶分子构象的变化，并促进它们的热变性；而在疏水色谱中，色谱介质的疏水性越高，α－淀粉酶分子在其上的构象变化温度越低。