| ARMS实时PCR基因分型特异性的研究 |
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| 引用本文： | 郑薇薇,梁基选,李庆阁.ARMS实时PCR基因分型特异性的研究[J].厦门大学学报(自然科学版),2005,44(6):135-139. |
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| 作者姓名： | 郑薇薇 梁基选 李庆阁 |
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| 作者单位： | [1]厦门大学生命科学学院生物医学系，细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室 [2]厦门大学医学院抗癌研究中心，福建厦门361005 |
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| 摘 要： | 以原癌基因K—ras基因12位密码子的4种基因型(野生型为GGT，突变型为AGT、TGT、CGT)质粒DNA为研究模型．采用SYBR Green I为实时PCR指示剂，进行ARMS实时PCR基因分型特异性的研究．结果表明：在和模板匹配的ARMS引物3′端附近引人故意错配碱基．将ARMS引物浓度稀释10倍，并对传统三步PCR循环进行改良．即根据目的产物和引物二聚体的熔点差异．在传统延伸步骤之后增加一步恒温80℃检测荧光步骤。可消除引物二聚体的影响．使ARMS引物的特异性增强．得到清晰的基因分型结果．实验表明这种基于SYBR Green I的ARMS实时PCR基因分型方法，无需合成探针，实验设计简单．是一种快速、简便、经济、特异性好的基因分型方法，可推广用于其他基因的分型。并可望成为应用于临床的基因诊断技术之一．
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| 关 键 词： | 基因分型 特异性 PCR 实时 Green 引物二聚体 基因诊断技术 SYBR 分型方法 ras基因 质粒DNA 原癌基因 研究模型 引物浓度 模板匹配 实验设计 GGT 野生型 基因型 密码子 12位 AGT 突变型 TGT 指示剂 R基因 传统 碱基 错配 |
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