| 小麦AGPase胞质型小亚基SSUⅠ的克隆及过表达反义表达与RNAi干扰载体的构建 |
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| 引用本文： | 康国章,张孟琴,官春云,郭天财,朱云集.小麦AGPase胞质型小亚基SSUⅠ的克隆及过表达反义表达与RNAi干扰载体的构建[J].兰州大学学报(自然科学版),2008,44(2):41-47. |
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| 作者姓名： | 康国章 张孟琴 官春云 郭天财 朱云集 |
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| 作者单位： | [1]河南农业大学国家小麦工程技术研究中心,河南郑州450002 [2]河南科技大学林业职业学院,河南洛阳471002 [3]湖南农业大学农学院,湖南长沙410128 |
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| 摘 要： | 采用RT-PCR方法从小麦品种豫教2号的发育籽粒中克隆出小麦淀粉合成关键酶AGPase胞质型小亚基（AGPase plastic small subunit,SSU Ⅰ）的cDNA全长,并构建了此基因的过表达、反义表达和RNAi干扰载体.SSUI的cDNA全长为1465 bp（GenBank No.EF405961）,编码域长度为1 422 bp,位于EF405961的2～1 423 bp.同源性比较结果表明：与GenBank上已报道的SSU I基因（X66080,AF244 997,Z48562）同源性达98%～99%.以pWM101质粒为基础,构建了由35 S启动子调控的SSU I基因的过表达载体pWM101SSU Ⅰ S;将该基因反向置于pBI121质粒的CaMV35S启动子之后,构建了SSU Ⅰ的反义表达载体pBI121SSU Ⅰ A.同时还克隆出SSU Ⅰ基因的一段260 bp高保守序列,以pFGC5941质粒为基础,构建了RNAi干扰载体pFGC5941SSU Ⅰ.
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| 关 键 词： | 普通小麦 AGPase胞质型小亚基 表达载体 |
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