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STK11基因启动子区域的克隆
作者姓名:宁文锋  王永俊  姚茂金  汤建光  汪斐  周世权  李陈捷  施小六
作者单位:中南大学湘雅二医院, 长沙 410011
基金项目:国家自然科学基金资助项目(批准号:30400537)
摘    要:通过生物信息学分析,预测人STK11基因可能的转录起始位点和重要的调控区域.以此为基础,构建含人STK11基因上游序列缺失片段的pGL3重组载体,瞬时转染L-02和HeLa两种细胞系,通过检测荧光素活性分析缺失片段的启动活性.结果显示各缺失片段在两株细胞中均有启动活性;当3′端固定在-918时,5′端由-1943—-1425的移位对启动活性无明显影响,提示这一区间内不存在重要的顺式作用元件;将5′端固定在-1943时,随着3′端向5′的缩短(-918→-1039→-1160),启动活性明显增强(活性pGL3-1943A>pGL31943B>pGL3-1943C),提示-1160—-1039和-1039—-918的区间分别存在负性顺式作用元件,同时提示核心启动子的3′端位于-1160的5′末端.在pGL31322(-1322—-918)亦观察到启动活性,提示核心启动子的5′端应该位于-1322的3′末端.因此,人STK11基因的核心启动子位于-1322—-1160之间.

关 键 词:STK11基因  生物信息学  启动子  顺式作用元件  转录起始位点
收稿时间:2005-11-21
修稿时间:2005-11-212006-01-06
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