ALA-PDT对健康人及银屑病患者PBMCs生物效应的实验研究

目的:通过研究ALA-PDT对体外培养的PBMCs的生物效应,探讨ALA -PDT对银屑病的免疫功能的影响、治疗的可行性及优化参数.方法:将健康人及银屑病患者新鲜外周血分别进行PBMCs分离与培养,分设空白对照组、单纯ALA组、单纯照光组以及不同ALA浓度与不同用药孵育时间组进行PDT.Annexin V/PI双染法、MTT法检测PBMCs存活率,以确定ALA最佳药物浓度和最佳用药孵育时间;TEM观察PBMCs细胞超微结构的变化；RT-PCR检测PBMCs表达Th1、Th2相关细胞因子的水平.结果:0.6 mmol/L ALA避光孵育1h后PDT组PBMCs存活率最低(P＜ 0.05); ALA-PDT后PBMCs结构呈现典型凋亡改变；银屑病患者PBMCs的IFN-γ、TNF-α mRNA表达量与健康人相比显著升高,ALA-PDT后表达量显著下降、IL-4 mRNA表达量较健康人显著降低,经ALA-PDT后显著升高(P＜0.05); IL-10mRNA表达量较健康人略有减低,经ALA-PDT后有所升高,但无统计学意义.结论:0.6 mmol/L ALA避光作孵育1h后PDT可明显促进PBMCs凋亡,银屑病患者PBMCs经ALA-PDT后由Th1优势应答向Th1/Th2平衡方向转变.

Biological Effects of ALA-PDT on PBMCs from Healthy and Psoriatic Patients