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蛋白质在固定Zn2+金属螯合亲和色谱中的变性热力学
引用本文:李蓉,陈国亮,赵文明.蛋白质在固定Zn2+金属螯合亲和色谱中的变性热力学[J].分析化学,2006,34(1):57-61.
作者姓名:李蓉  陈国亮  赵文明
作者单位:1. 西安交通大学生命科学与技术学院,西安,710049;西北大学化工学院,西安,710069
2. 西北大学化工学院,西安,710069
3. 西安交通大学生命科学与技术学院,西安,710049
摘    要:在15~85℃宽温度范围,研究了蛋白质在固定Zn2 金属螯合色谱系统中的热行为和变性热力学。实验结果表明,蛋白质在色谱过程都有一个固定的热转变温度:核糖核酸酶(RNase)、α-胰凝乳蛋白酶原A(α-Chy)的热转变温度约为55℃,细胞色素C(Cyt-C)和溶菌酶(Lys)约为65℃;,热转变温度的出现标志蛋白质构象发生变化;利用Van′tHoff作图测定了蛋白质在色谱系统热变性时的标准焓变ΔH°和标准熵变ΔS°,提出用标准熵变ΔS°和自由能变ΔG°判断蛋白质构象变化;利用ΔH°-ΔS°的线性关系估算了蛋白质热变性时的补偿温度,鉴定了蛋白质各变体在金属螯合色谱中保留机理的同一性,RNase、Cyt-C、Lys和α-Chy的补偿温度分别为55℃、65.8℃、65.2℃和54.8℃;根据蛋白质热变性时的补偿温度和构象变化熵变Δ(ΔS°)的大小,讨论了蛋白质在阳离子交换色谱和固定Zn的金属螯合色谱体系中的热稳定性。实验证明,在IDA裸柱引入Zn2 后蛋白质在色谱系统中的热稳定性减小,平均补偿温度从65.3℃降低到59.7℃,而构象变化熵变的绝对值大幅度升高。

关 键 词:金属螯合亲和色谱  蛋白质  热力学  热变性
收稿时间:2005-03-08
修稿时间:2005-03-082005-05-31

Denatured Thermodynamics of Proteins in Immobilized Zn2 + Metal Chelate Affinity Chromatography
Li Rong,Chen Guoliang,Zhao Wenming.Denatured Thermodynamics of Proteins in Immobilized Zn2 + Metal Chelate Affinity Chromatography[J].Chinese Journal of Analytical Chemistry,2006,34(1):57-61.
Authors:Li Rong  Chen Guoliang  Zhao Wenming
Abstract:
Keywords:Metal chelate affinity chromatography  protein  thermodynamics  thermal denaturation
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