| DHL细胞中5-ALA代谢PpⅨ的定位分析 |
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| 作者姓名： | 陈冠楠 黄祖芳 陈荣 林居强 杨坤涛 李钻芳 |
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| 作者单位： | 华中科技大学光电子科学与工程学院,湖北,武汉,430074;福建师范大学,医学光电科学与技术教育部重点实验室,福建,福州,350007;福建师范大学,医学光电科学与技术教育部重点实验室,福建,福州,350007;华中科技大学光电子科学与工程学院,湖北,武汉,430074 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金,厦门大学固体表面物理化学国家重点实验室开放课题和福建省科技项目 |
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| 摘 要： | 采用共聚焦显微技术中的双光子激发荧光方法获得DHL细胞中5-氨基酮戊酸(5-ALA)代谢原卟啉Ⅸ(PpⅨ)荧光图像.结合Rhodamine123、DioC6(3)和LysoTraeker Green三种细胞器荧光探针的使用,采用双标的标记方法观察DHL细胞中5-ALA代谢PpⅨ在DHL细胞的定位分布,进而利用Matlab软件对获得的定位的融合荧光图像进行相关系数计算.通过Matlab软件编写程序对获得的定位图像进行边缘检测、提取和分割等处理,计算获得的线粒体相关系数r=0.564;内质网相关系数r=0.465;溶酶体相关系数r=0.366;可以认为5=ALA代谢PpⅨ在线粒体、内质网、溶酶体三种细胞器区域均有分布,但PpⅨ在不同细胞器聚集程度存在比较大的差异,经过3 h的孵育代谢PpⅨ主要积聚于线粒体,而溶酶体中积聚的最少.研究表明双光子激发荧光可成为定性或定量研究DHL细胞中5-ALA代谢PpⅨ以及PpⅨ在细胞定位的重要方法.
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| 关 键 词： | 医用光学与生物技术 双光子激发荧光 5-ALA PpⅨ DHL细胞 细胞定位 定量分析 |
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