大熊猫白血病抑制因子RNAi干扰载体的构建及应用 |
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引用本文: | 李非平,刘玉良,王神飞,张梦诗,胡贤彪,安俊辉,王东辉,张名岳,侯蓉,蔡开来.大熊猫白血病抑制因子RNAi干扰载体的构建及应用[J].西南民族大学学报(自然科学版),2023(6):609-615. |
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作者姓名: | 李非平 刘玉良 王神飞 张梦诗 胡贤彪 安俊辉 王东辉 张名岳 侯蓉 蔡开来 |
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作者单位: | 成都大熊猫繁育研究基地四川省濒危野生动物保护生物学重点实验室 |
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基金项目: | 四川省自然科学基金重点项目(2022NSFSC0010); |
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摘 要: | 旨在构建大熊猫白血病抑制因子(LIF)RNAi重组质粒,以期进一步研究LIF对大熊猫骨髓间充质干细胞(PDBM-MSCs)的调控作用.试验设计3组大熊猫LIF shRNA慢病毒pLKO.1 puro-LIF-down干扰载体,通过慢病毒的方式感染PDBM-MSCs,经q-PCR鉴定重组质粒pLKO.1 puro-LIF-down-1抑制效果最显著.pLKO.1 puro-LIF-down-1实验组和空质粒对照组比较发现,LIF mRNA表达水平抑制后能够显著下调细胞周期调控基因CDK2、CCNB2、CCND3的mRNA表达水平(P<0.05);显著上调凋亡基因P53、P16、P27、caspase3的mRNA表达水平(P<0.05);显著下调干性基因KLF4、SOX2的mRNA表达水平(P<0.05).以上结果表明,此次研究成功构建出大熊猫LIF RNAi干扰载体,LIF对PDBM-MSCs的生长和干性维持具有重要的调控作用,为大熊猫干细胞的体外培养及干性机制的研究奠定基础.
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关 键 词: | 大熊猫 LIF 骨髓间充质干细胞 |
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