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家鸡卵清蛋白基因调控序列克隆与分析
作者姓名:张彦  于晓婕  李娟  王亚军
作者单位:四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室;四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室;四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室;四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室
基金项目:国家自然科学基金(31172202, 31271325)
摘    要:本文扩增了包含卵清蛋白5’侧翼上游约3.4kb片段及其第一外显子、第一内含子与第二外显子的一部分,并分别删除5’端的一个DNA酶超敏感位点(DHSs)和第一内含子,得到四个不同长度的调控序列.经测序后,将四个片段分别连接在带有绿色荧光蛋白基因的pcDH-EGFP载体上,并同时为了消除载体上的CMV启动子的影响而将之切除,从而得到OV1.1k-EGFP,OV3.4k-EGFP,OV1.1k-intron-EGFP和OV3.4k-intron-EGFP四种慢病毒载体.经酶切鉴定这四种表达载体构建正确,并且尝试用OV1.1k-EGFP慢病毒载体转染培养家鸡原代输卵管细胞后,标记基因(EGFP)成功表达.这些结果为后续深入探究家鸡卵清蛋白基因调控序列功能奠定基础.

关 键 词:家鸡  卵清蛋白启动子  分子克隆  表达载体构建
收稿时间:2013-04-19
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