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基于生物质谱的乙酸酐稳定同位素标记定量蛋白质组学方法的建立与优化
引用本文:刘新 应万涛 周春喜 蔡耘 钱小红. 基于生物质谱的乙酸酐稳定同位素标记定量蛋白质组学方法的建立与优化[J]. 分析化学, 2007, 35(12): 1687-1695
作者姓名:刘新 应万涛 周春喜 蔡耘 钱小红
作者单位:北京放射与辐射医学研究所,北京放射与辐射医学研究所,北京放射与辐射医学研究所,北京放射与辐射医学研究所,北京放射与辐射医学研究所 北京100850,北京蛋白质组研究中心,北京102206,蛋白质组学国家重点实验室,北京102206,北京100850,北京蛋白质组研究中心,北京102206,蛋白质组学国家重点实验室,北京102206,北京100850,北京蛋白质组研究中心,北京102206,蛋白质组学国家重点实验室,北京102206,北京100850,北京蛋白质组研究中心,北京102206,蛋白质组学国家重点实验室,北京102206,北京100850,北京蛋白质组研究中心,北京102206,蛋白质组学国家重点实验室,北京102206
基金项目:本文系国家自然科学基金(No.20405017,No.20505018,No.20505019)、北京市科技计划重大项目(No.H030230280190)、国家重点基础研究发展规划项目(No.2004CB518707)、国家自然科学基金重点项目(No.20635010)和国家科技计划课题(N0.2006CBOD1600)资助课题
摘    要:建立了一种基于生物质谱的乙酸酐稳定同位素标记,定量蛋白质组学研究方法,优化了影响标记效率的各种条件。在pH8.0的Na2B4O7/H3BO3缓冲体系中,当乙酸酐摩尔浓度25倍过量于肽段摩尔量,22℃反应30 min时,标记即可完全。对多对H6/D6-乙酸酐标记肽段在基质辅助激光解吸电离质谱中的动态范围及定量准确度进行了考察,并通过串联质谱分析确定了乙酰化位点。结果表明:在10倍和30倍动态范围内,线性关系良好(r=0.99,r=0.98),理论值和观测值的偏差分别为0.5%和20%。

关 键 词:乙酸酐稳定同位素标记  定量蛋白质组学  生物质谱
收稿时间:2007-01-17
修稿时间:2007-07-15

Establishment and Optimization of Acetic Anhydride Stable Isotope Labeling Method Based on Mass Spectrometry in Quantitative Proteomics
Liu Xin, Ying Wan-Tao, Zhou Chun-Xi, Cai Yun, Qian Xiao-Hong. Establishment and Optimization of Acetic Anhydride Stable Isotope Labeling Method Based on Mass Spectrometry in Quantitative Proteomics[J]. Chinese Journal of Analytical Chemistry, 2007, 35(12): 1687-1695
Authors:Liu Xin   Ying Wan-Tao   Zhou Chun-Xi   Cai Yun   Qian Xiao-Hong
Abstract:
Keywords:Acetic anhydride stable isotope labeling  quantitative proteomics  biological mass spectrometry
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