反相高效液相色谱法测定保健品中反式维生素K_1的含量

建立了反相高效液相色谱法测定保健品中维生素K_1反式构体含量的方法。将维生素K_1补充片剂研磨成粉后,称取0.25 g样品,用异丙醇溶解后,定容至50 mL棕色容量瓶中,用0.45μm滤膜过滤,取上清液,采用Phenyl柱,以不同体积比的甲醇和50 mmol·L~(-1)乙酸溶液的混合液为流动相进行梯度洗脱。结果显示:在上述色谱条件下,顺、反式维生素K_1的分离度(R_S)为1.76,线性范围分别为0.01～2 mg·L~(-1)和0.04～8 mg·L~(-1),检出限(3S/N)分别为0.032 mg·L~(-1)和0.074 mg·L~(-1)。对空白样品进行3个浓度水平的加标回收试验,反式维生素K_1的回收率为92.0%～95.2%,测定值的日内相对标准偏差(RSD,n=6)为1.6%～2.2%,日间RSD(n=5)为2.4%～4.8%;顺式维生素K_1的回收率为90.0%～101%,测定值的日内RSD(n=6)为1.4%～2.3%,日间RSD(n=5)为2.6%～4.6%。方法用于实际样品分析,反式维生素K_1的检出量为75.36～80.12μg·g~(-1)。