|
|||||
|
|
| 固相金属亲和层析纯化全长人PPARγ重组蛋白 | |
| 作者姓名： | 夏铸 丁惠惠 余瑜 |
| 作者单位： | 1. 重庆医科大学附属第一医院 重庆市渝中区袁家岗友谊路1号 400016 2. 重庆医科大学附属第二医院 重庆市渝中区临江路76号 400010 3. 重庆医科大学药学院 重庆渝中区医学院路1号 400016 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 |
| 摘 要： | 建立全长人PPARγ重组蛋白的固相金属亲和层析纯化方法.利用E.coli BL21 (DE3)细胞外源性表达出全长人PPARγ重组蛋白,采用固相金属亲和层析法纯化目标蛋白.通过考察咪唑浓度对纯化的影响,确定在8 mol/L尿素下,用含50 mmol/L咪唑的缓冲液冲洗,200mmol/L咪唑缓冲液洗脱,可获得纯度为95％的目标蛋白,透析复性后经放射配体受体饱和结合实验测定全长人PPARγ重组蛋白的解离常数Kd为106士6nmol/L.结果表明本文所建立的方法能够成功纯化出高纯度的目标蛋白,经复性后,可获得用于结构和功能研究的全长人PPARγ重组蛋白. |
| 关 键 词： | 固相金属亲和层析 全长入过氧化物酶体增殖物激活受体y 活性 |
| 本文献已被 万方数据 等数据库收录！ | |