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灰绿曲霉产纤维素酶的研究
引用本文:陶毅明,马素娟,邬小兵,龙敏南,黄建忠,陈清西.灰绿曲霉产纤维素酶的研究[J].厦门大学学报(自然科学版),2010,49(3).
作者姓名:陶毅明  马素娟  邬小兵  龙敏南  黄建忠  陈清西
作者单位:1. 厦门大学,生命科学学院,细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室
2. 厦门大学,生命科学学院,细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门大学能源研究院,福建,厦门,361005
3. 福建师范大学工业微生物教育部工程研究中心,福建,福州,351008
4. 厦门大学,生命科学学院,细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室;福建师范大学工业微生物教育部工程研究中心,福建,福州,351008
基金项目:国家重点基础研究发展规划(973计划),福建省自然科学基金,福建师范大学工业微生物教育部工程研究中心开放项目 
摘    要:灰绿曲霉(Aspergillus glaucus)发酵液通过硫酸铵盐析、Sephadex G-100分子筛、DEAE Sepharose Fast Flow离子交换柱和Phenyl Sepharose Fast Flow疏水层析,分离纯化一种外切葡聚糖酶(CBH)和一种内切葡聚糖酶(EG).通过SDS-PAGE和凝胶柱层析法测定分子质量表明:CBH全酶分子质量为71 ku,由两个分子质量为35 ku的同型亚基组成;EG为单体蛋白,全酶分子质量为32 ku.酶学性质研究表明:CBH催化pNPC的最适pH为6.0,最适温度为55 ℃,酶活在pH 5.0~8.0 区间和温度低于55 ℃时稳定;EG催化CMC-Na的最适pH为4.0,最适温度为50 ℃,酶活在pH 3.5~7.5区间和温度低于65 ℃时稳定.Na+、K+、Ba2+、Mg2+以及NO-3和SO2-4对CBH和EG酶活均无影响;Ca2+和Mn2+对CBH有激活作用,Fe2+和Mn2+对EG有激活作用,而Zn2+、Cd2+和Cu2+对CBH和EG均有不同程度的抑制效应.酶动力学分析表明:CBH催化pNPC水解的米氏常数Km值为1.4 mmol/L(pH 6.0,55 ℃),EG催化CMC-Na水解的米氏常数Km值为5.0 mg/mL(pH 4.0,50 ℃).

关 键 词:灰绿曲霉  纤维素酶  外切葡聚糖酶  内切葡聚糖酶  分离纯化  酶学性质

Cellulase Production from Aspergillus glaucus
TAO Yi-ming,MA Su-juan,WU Xiao-bing,LONG Min-nan,HUANG Jian-zhong,CHEN Qing-xi.Cellulase Production from Aspergillus glaucus[J].Journal of Xiamen University(Natural Science),2010,49(3).
Authors:TAO Yi-ming  MA Su-juan  WU Xiao-bing  LONG Min-nan  HUANG Jian-zhong  CHEN Qing-xi
Abstract:
Keywords:
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