|
|||||
|
|
| 人嗜中性白细胞活化蛋白-1/白细胞介素-8基因的半化学半酶促合成及在大肠杆菌的表达 | |
| 作者姓名： | 金冬雁 徐荣辉 周圆 王平 侯云德 |
| 作者单位： | 中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室，中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室，中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室，中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室，中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室 北京 100052，北京 100052 客座研究人员，广州医学院微生物学教研室，北京 100052，北京 100052，北京 100052 |
| 摘 要： | 本文采用半化学半酶促法合成了人嗜中性白细胞活化蛋白-1/白细胞介素-8(NAP-1/IL-8)的全基因,并在大肠杆菌系统中利用P_RP_1串联启动子进行了温控型的高效表达,通过SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测表明,在摇瓶培养的大肠杆菌中,NAP-1/IL-8的表达量可占菌体可溶性蛋白的18.5％,而在实验室规模的发酵试验中,其表达量则占可溶性蛋白的10.9％.经凝胶过滤层析和阳离子交换层析两个简单的纯化步骤,得到SDS-PAGE纯的重组NAP-1/IL-8,采用琼脂糖平板法进行测定,表明所得NAP-1/IL-8纯品在<10ng/ml的水平上显示出强烈的嗜中性白细胞趋化活性,家兔皮肤试验的结果显示,重组人NAP-1/IL-8可在家兔体内引起早发型超敏反应,采用Edman降解法测定重组人NAP-1/IL-8纯品N末端36个氨基酸的序列,与天然人NAP-1/IL-8的成熟分子完全符合。 |
| 关 键 词： | 人嗜中性白细胞活化蛋白-1/白细胞介素-8 基因的化学合成 克隆化基因的表达 蛋白质测序 |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ | |