| 修饰脂肪酶催化水解反应的动力学和热力学研究 |
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| 引用本文： | 熊亚红. 修饰脂肪酶催化水解反应的动力学和热力学研究[J]. 分子催化, 2010, 24(5) |
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| 作者姓名： | 熊亚红 |
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| 作者单位： | 华南农业大学理学院生物材料研究所 |
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| 基金项目： | 华南农业大学"211工程"重点学科建设项目,国家自然科学基金(青年科学基金项目),广东省科技计划项目 |
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| 摘 要： | 采用邻苯二甲酸酐(PA)对猪胰脂肪酶(PPL)进行了化学修饰,以三硝基苯磺酸法测定修饰酶的平均氨基修饰度,并比较了酶修饰前后的紫外光谱和荧光光谱;采用动力学方法考察了酸碱和热对修饰酶水解活性和稳定性的影响,并计算了一系列动力学和热力学参数.实验结果表明:PA对PPL的修饰度为30%,脂肪酶PPL经PA修饰后,其紫外特征吸收峰发生红移,吸收强度降低,而且最大荧光发射峰发生蓝移,荧光强度增大;PPL经PA修饰前后,催化水解反应的最适pH和最适温度未发生变化,仍为pH7.5和40℃,但修饰后酶催化水解的效率和酶与底物的亲和力得到有效提高,反应的活化能Ea、自由能ΔG≠、活化焓ΔH≠及活化熵ΔS≠均明显降低,如最适条件下修饰酶PA-PPL和脂肪酶PPL的转化数kcat和反应的活化能Ea分别为39.8 s-1、25.8 kJ/mol和34.4s-1、43.8kJ/mol;PPL经PA修饰后,酶分子热变性的热力学参数(变性活化能Ea,d、变性自由能ΔGd≠、变性活化焓ΔHd≠及变性活化熵ΔSd≠)均增大,半衰期t1/2延长,酶分子的热稳定性也得到有效提高.
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| 关 键 词： | 脂肪酶 化学修饰 稳定性 动力学 热力学参数 |
| 收稿时间： | 2010-07-03 |
| 修稿时间： | 2010-07-16 |
Study on the Hydrolysis Catalyzed by Modified Pocine Pancreas Lipase by Kinetics and Thermodynamics |
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| XIONG Ya-hong,SU Jian-hong,LIU Xiao-ping. Study on the Hydrolysis Catalyzed by Modified Pocine Pancreas Lipase by Kinetics and Thermodynamics[J]. Journal of Molecular Catalysis (China), 2010, 24(5) |
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| Authors: | XIONG Ya-hong SU Jian-hong LIU Xiao-ping |
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| Affiliation: | Institute of Biomaterial, College of Science, South China Agricultural University |
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