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大分子拥挤条件下光诱导细胞色素C还原的光谱研究
引用本文:刘艳伟,曹洪玉,唐乾,郑学仿*. 大分子拥挤条件下光诱导细胞色素C还原的光谱研究[J]. 化学学报, 2014, 72(2): 246-252. DOI: 10.6023/A13101029
作者姓名:刘艳伟  曹洪玉  唐乾  郑学仿*
作者单位:a 大连大学生命科学与技术学院 大连 116622;b 辽宁省生物有机化学重点实验室 大连大学 大连 116622
基金项目:国家自然科学基金(No.21271036,20871024);辽宁省教育厅科学技术研究项目(No.L2013470,2013471)资助~~
摘    要:稀溶液中高铁细胞色素C(ferric cytochrome c,Fe(Ⅲ)-Cyt c)能被光照还原成亚铁细胞色素C(ferrous cytochrome c,Fe(Ⅱ)-Cyt c),但这一研究忽略了生物体细胞的真实环境是高度拥挤的,因此采用紫外可见、同步荧光及圆二色谱光谱法研究了大分子拥挤环境中光诱导Cyt c的还原过程及其对外界环境的依赖情况. UV-Vis光谱和同步荧光光谱结果表明,拥挤试剂葡聚糖70(Dextran70)和聚蔗糖70(Ficoll70)的加入利于Cyt c光还原的进行,且Ficoll70存在时Cyt c光还原程度远高于Dextran70存在时;Dextran70和Ficoll70环境中光诱导Cyt c还原的最适温度分别为37 ℃和25 ℃,定波长280 nm光照射利于Cyt c还原;Cyt c的光还原程度随着Dextran70浓度增加而增大,Ficoll70环境中Cyt c的最适光还原浓度为100 g·L-1;拥挤环境下Met,Trp,Tyr和Phe的存在对光诱导Cyt c的还原过程依Phe> Tyr> Trp> Met顺序有催化促进作用;CD光谱结果表明光照射稀溶液中Cyt c蛋白还原后,其α-螺旋含量降低,β-折叠含量升高,而光照射拥挤环境中Cyt c还原后蛋白的二级结构基本没变化. 结果表明拥挤试剂具有稳定蛋白质二级结构的作用,且影响光还原Cyt c的电子传递过程及效率.

关 键 词:大分子拥挤环境  光照还原  细胞色素C  光谱法  蛋白二级结构  

Spectral Study on the Photoreduction of Cytochrome c under Macromolecular Crowding
Liu Yanwei,Cao Hongyu,Tang Qian,Zheng Xuefang. Spectral Study on the Photoreduction of Cytochrome c under Macromolecular Crowding[J]. Acta Chimica Sinica, 2014, 72(2): 246-252. DOI: 10.6023/A13101029
Authors:Liu Yanwei  Cao Hongyu  Tang Qian  Zheng Xuefang
Affiliation:a School of Life Science and Biotechnology, Dalian University, Dalian 116622;b Liaoning Key Laboratory of Bio-organic Chemistry, Dalian University, Dalian 116622
Abstract:
Keywords:macromolecular crowding environment  photoreduction  Cytochrome c  spectroscopy  secondary structure  
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