| T7噬菌体文库构建中载体制备及连接条件的优化 |
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| 引用本文： | 葛昆,钟理,赵隆华,王建飞,王海霞.T7噬菌体文库构建中载体制备及连接条件的优化[J].科技信息,2008(6):1-3. |
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| 作者姓名： | 葛昆 钟理 赵隆华 王建飞 王海霞 |
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| 作者单位： | 河北大学生命科学学院生物芯片研究室，河北大学生命科学学院生物芯片研究室，中国地质大学(河北保定)长城学院英语专业教研室，河北大学生命科学学院生物芯片研究室，河北大学生命科学学院生物芯片研究室 City of Hope National Medical Center，Duarte，California，USA |
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| 基金项目： | 非小细胞肺癌早期诊断蛋白芯片的研究(05J001) |
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| 摘 要： | 目的分离纯化T7噬菌体DNA并构建T7select10-3b载体.方法用酚和氯仿:异戊醇(24:1)提取得到T7噬菌体DNA.用EcoRI和HindIII对T7DNA进行双酶切 ,得到载体的左臂和右臂.最后通过试剂盒从琼脂糖凝胶中回收载体的左右臂,用紫外分光光度计测定其纯度.与外援片段连接后进行体外包装.结果构建得到T7select10-3b载体 ,载体的左右臂大小分别为19kb和16kb,并成功包装成噬菌体颗粒.结论本方法适合大量提取纯化T7DNA和T7select10-3b载体,得到的载体可用于构建cDNA文库等其它基因工程的操作.
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| 关 键 词： | T7噬菌体DNA DNA提取 酶切 体外包装 |
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