| Rosa26-LEM4定点转基因小鼠模型构建 |
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| 引用本文： | 董雨馨,徐飞,马梦涵,陈凌,朱正茂.Rosa26-LEM4定点转基因小鼠模型构建[J].南开大学学报,2024(1):40-44. |
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| 作者姓名： | 董雨馨 徐飞 马梦涵 陈凌 朱正茂 |
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| 作者单位： | 1. 南开大学生命科学学院;2. 南开大学附属妇产医院病理科 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(91649107)； |
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| 摘 要： | 为研究LEM4基因在肿瘤发生发展中的生物学功能,采用CRISPR/Cas9技术,在小鼠基因组的Rosa26位点插入CAG-lox P-STOP-lox P-h LEM4-3×FLAG-IRES-EGFP,建立了Rosa26-LEM4定点转基因小鼠模型.依据小鼠Rosa26位点序列设计合成g RNA、构建含同源序列和目的序列CAG-lox P-STOP-lox P-h LEM4-3×FLAG-IRES-EGFP的插入序列,和Cas9核酸酶m RNA共同注射入小鼠的受精卵中并获得敲入小鼠后代,经Southern blot鉴定、以及PCR扩增插入序列后的序列分析鉴定出F0首建鼠,F0首建鼠与野生型小鼠杂交后获得基因型为Rosa26-LEM4flox-LSL/wt的F1代小鼠.Rosa26-LEM4flox-LSL/wt小鼠自交后获得Rosa26-LEM4flox-LSL/flox-LSL基因型小鼠.Rosa26-LEM4flox-LSL/flox-LS...
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| 关 键 词： | LEM4 Rosa26位点 定点敲入 |
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