| 蛋白A-藻蓝蛋白β亚基融合蛋白的性质及应用 |
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| 引用本文： | 孙雅芳,谢冰清,夏坤,陈思礼,周明.蛋白A-藻蓝蛋白β亚基融合蛋白的性质及应用[J].武汉大学学报(理学版),2010,56(3). |
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| 作者姓名： | 孙雅芳 谢冰清 夏坤 陈思礼 周明 |
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| 作者单位： | 1. 中南民族大学,生命科学学院,湖北,武汉,430074
2. 华中科技大学,环境科学与工程学院,湖北,武汉,430074
3. 华中农业大学,农业微生物国家重点实验室,湖北,武汉,430070;华中农业大学,生物质与生物能源研究中心,湖北,武汉,430070 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | PCR扩增金黄色葡萄球菌蛋白A基因spa,通过酶切位点的转换构建重组质粒pET-spa,进一步成功构建能表达融合蛋白SPA-CpcB的质粒pET-spa-cpcB.将重组质粒pET-spa-cpcB与在大肠杆菌内生成藻胆色素必需的质粒,以及藻胆蛋白裂合酶质粒,共同转入大肠杆菌BL21(DE3)内,进行体内重组,生物合成融合色素蛋白.蛋白质电泳以及锌染色结果表明,体内重组分别获得了融合色素蛋白SPA-CpcB-PCB或SPA-CpcB-PEB.吸收光谱与荧光光谱结果表明,融合色素蛋白SPA-CpcB-PCB或SPA-CpcB-PEB具有与CpcB-PCB或CpcB-PEB相同的光谱特征.将SPA-CpcB-PEB与生物素标记的兔抗体进行荧光免疫反应,通过多功能微孔板荧光检测仪检测,结果表明融合色素蛋白SPA-CpcB-PEB具有SPA能与多种哺乳动物血清中的IgG的Fc段结合的特点.利用SPA-CpcB-PEB来检测包被于聚苯乙烯微量反应板的基因编码为all5292的蛋白,证实了该融合色素蛋白可用于免疫检测.
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| 关 键 词： | 融和蛋白 金黄色葡萄球菌蛋白A 藻蓝蛋白 |
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