| 应用“酶切连接”克隆法构建TALEs |
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| 引用本文： | 梁龙,杨华,杨永林,石国庆,刘守仁,皮文辉.应用“酶切连接”克隆法构建TALEs[J].石河子大学学报,2013(3):306-312. |
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| 作者姓名： | 梁龙 杨华 杨永林 石国庆 刘守仁 皮文辉 |
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| 作者单位： | 石河子大学动物科技学院;新疆农垦科学院畜牧兽医研究所;新疆兵团绵羊繁育生物技术重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(31060159);新疆兵团博士资金项目(2009JC05);国家留学基金委“西部地区人才培养特别项目” |
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| 摘 要： | TALEs是在植物病原菌黄单胞杆菌(Xanthomonas)上发现的一类天然的DNA结合蛋白,其重复域已经成为模块化构建单元,用于人工DNA结合蛋白的构建。人工TALEs能够用于多种基因工程操作,包括转录调节和基因组编辑。为了在常规分子生物学实验室稳定、经济地构建TALE-TFs和TALENs,本文采用TALE Toolbox试剂盒,运用PCR扩增和"酶切-连接"克隆法构建人工TALEs。结果表明,该构建策略是一种快速高效构建TALEs的方法,能够在1周内完成TALEs构建。
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| 关 键 词： | 转录激活因子样效应子 “酶切-连接”克隆法 |
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