| 人IFN-γ在大肠杆菌中高效表达和色谱复性研究 |
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| 引用本文： | 王骊丽,耿信笃,韩骅.人IFN-γ在大肠杆菌中高效表达和色谱复性研究[J].西北大学学报,2003,33(5):540-544. |
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| 作者姓名： | 王骊丽 耿信笃 韩骅 |
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| 作者单位： | [1]西北大学现代分离科学研究所／现代分离科学陕西省重点实验室，陕西西安710069 [2]第四军医大学医学遗传学与发育生物学教研室，陕西西安710032 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(No.29675017) |
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| 摘 要： | 从健康人外周血分离单核细胞，经LPS刺激后提取总RNA，用RT—PCR扩增hIFN-γ的cD—NA。将扩增产物克隆后进行序列分析证明，克隆的hIFN-γcDNA除存在2个序列多态性位点外，与天然的干扰素氨基酸序列完全一致。利用温控表达系统在大肠杆菌中实现了hIFN-γ的高效表达，表达的目的蛋白可占茵体总蛋白的55％。用5L和50L发酵罐放量生产的产物，经高效疏水色谱HPHIC直接复性和纯化得到了重组hIFN-γ纯品，其比活性与天然蛋白相近．
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| 关 键 词： | 人干扰素-γ 反转录聚合酶链反应 重组蛋白表达 复性与纯化 高效疏水色谱 |
| 文章编号： | 1000-274X(2003)05-0540-05 |
| 修稿时间： | 2003年2月24日 |
Refolding and high-level expression study on human interferon-γ in E. coli |
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