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基于电子转移/高能碰撞解离质谱碎裂的O-GlcNAc糖基化位点定量分析方法在高脂喂养小鼠肝脏糖蛋白质组分析中的应用
作者姓名:邵文亚  梁玉  刘键熙  刘洪涛  王钊伟  随志刚  赵宝锋  张晓丹  梁振  张丽华  张玉奎
作者单位:福建医科大学公共卫生学院预防医学系,福州350122;中国科学院大连化学物理研究所,中国科学院分离分析化学重点实验室,国家色谱研究分析中心,大连116023;中国科学院大连化学物理研究所,中国科学院分离分析化学重点实验室,国家色谱研究分析中心,大连116023;福建师范大学环境科学与工程学院,福州350007;中国科学院过程工程研究所,生化工程国家重点实验室,北京100190;中国科学院计算技术研究所,北京100190
基金项目:福建省自然科学基金;国家自然科学基金;福建医科大学项目
摘    要:O-连接N-乙酰葡糖胺翻译后修饰(O-GlcNAc)是发生在蛋白质丝氨酸或者苏氨酸位点上的单糖修饰,由于其具有化学计量数少、在质谱鉴定中离子化效率低以及无特定的氨基酸序列等特点,使O-GlcNAc翻译后修饰位点的定性和定量分析难度较大。本研究结合基于凝集素弱亲和色谱的O-GlcNAc修饰糖肽富集方法、本研究组发展的准等重六重标记定量方法和电子转移/高能碰撞解离(EThcD)模式的高分辨质谱技术,发展了一种O-GlcNAc修饰位点的高通量定量分析方法,对高脂喂养小鼠肝脏中蛋白质O-GlcNAc修饰位点进行规模化定量分析。共定量分析了783个O-GlcNAc位点,其中122个位点的表达量存在明显差异,对应于85个O-GlcNAc蛋白,并初步探讨了脂代谢过程中O-GlcNAc修饰的作用。本研究有望为肥胖和胆固醇酯沉积等营养代谢相关疾病提供新的治疗思路。

关 键 词:O-连接N-乙酰葡糖胺修饰  定量蛋白质组学  电子转移/高能碰撞解离
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