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基于适配体/金纳米粒子的“开-关”型荧光探针快速测定水胺硫磷
作者姓名:邹小波  蒋彩萍  李志华  孙悦  石吉勇  李艳肖  黄晓玮  张迪  胡雪桃  翟晓东  魏晓鸥
作者单位:1. 江苏大学食品与生物工程学院;2. 江苏大学分析测试中心
基金项目:国家重点研发计划项目(Nos.2017YFC1600806,2016YFD0401104);;国家自然科学基金项目(Nos.31801631,31671844,31601543);;江苏省自然科学基金(Nos.BK20160506,BE2016306,BK20180865);;江苏省国际科技合作项目(No.BZ2016013)资助~~;
摘    要:基于适配体和金纳米粒子(Gold nanoparticles, AuNPs)合成"开-关"型荧光探针,用于快速、灵敏、高选择性测定水胺硫磷。5’端连接荧光素(6-Carboxyfluorescein, FAM)的发卡型水胺硫磷适配体互补链(Complementary strand, cDNA)通过修饰于3’端的巯基连接到AuNPs表面,FAM(荧光信号分子)与AuNPs(荧光猝灭剂)间发生荧光共振能量转移效应(Fluorescence resonance energy transfer, FRET),导致荧光猝灭。加入水胺硫磷适配体(Isocarbophos-binding aptamer, ICP-Aptamer)与cDNA杂交,cDNA发卡构型被打开,使荧光信号恢复。当体系中存在水胺硫磷时,ICP-Aptamer与其特异性结合,导致与cDNA解离,cDNA发卡型结构重新恢复,使荧光信号猝灭。采用透射电镜、紫外-可见光谱、Zeta电位表征纳米粒子特性,优化了实验参数,包括pH值、ICP-Aptamer浓度、温育时间和温育温度。在优化的实验条件下,在0.02~10μmol/L线性范围内...

关 键 词:荧光探针  “开-关”型  适配体  金纳米粒子  水胺硫磷
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