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| 基于核酸外切酶Ⅲ及DNAzyme的铅离子荧光传感器的研究 | |
| 作者姓名： | 刘涛 李丹 梁杰 汪秀妹 |
| 作者单位： | 福建省新型污染物生态毒理效应与控制重点实验室莆田学院环境与生物工程学院 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(No.31801462)； |
| 摘 要： | 利用DNAzyme及核酸外切酶Ⅲ(ExoⅢ)构建了荧光生物传感器用于检测铅离子(Pb2+)。DNAzyme与底物探针结合并在Pb2+辅助作用下切割底物,使发夹结构的底物探针在环上修饰有RNA碱基处断裂,切割断裂底物探针后,DNAzyme被释放,继续与下一个底物探针结合并切割,利用DNAzyme可循环反复催化裂解底物的特性实现循环反应。底物探针被切割断裂后,形成的Y字形探针可与信标探针结合并打开其发夹结构,产生荧光信号,同时在ExoⅢ的作用下降解,从3′端开始切割水解被打开的信标探针,释放出底物探针,继续与下一个信标探针结合切割,形成第二步的循环信号放大。经过两步的循环反应,荧光信号得到不断增强,从而达到高灵敏检测的目的。200μL反应体系在37℃反应60 min后,其荧光信号与Pb2+浓度在0.05～200 nmol/L范围内呈良好的线性关系,检出限为0.01 nmol/L。用于实际样品中Pb2+的检测,加标回收率为96.3%～108.3%。本方法具有简单、快速、高选择性、高灵敏的特点,在Pb |
| 关 键 词： | 铅离子 脱氧核酸酶 核酸外切酶Ⅲ 荧光生物传感器 |