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| SARS CoV内对照RNA病毒样颗粒的构建和表达 | |
| 引用本文： | 李振勇,景建洲,刘明霞,屈凌波,李智涛,王云龙,赵玉芬.SARS CoV内对照RNA病毒样颗粒的构建和表达[J].离子交换与吸附,2006,22(1):68-76. |
| 作者姓名： | 李振勇 景建洲 刘明霞 屈凌波 李智涛 王云龙 赵玉芬 |
| 作者单位： | 1. 郑州大学化学系化学生物重点实验室,郑州,450052 2. 河南省生物工程技术研究中心,郑州,450056 3. 郑州大学化学系化学生物重点实验室,郑州,450052;河南省生物工程技术研究中心,郑州,450056 |
| 摘 要： | 在SARS-CoV的核酸检测方法中,由于普遍缺乏安全、稳定、特异的内对照,而不能对样品处理、反转录、扩增以及定量检测实施全程监控。构建的病毒样核蛋白颗粒内对照,能够对SARS-CoV临床检测实施监控。本文通过克隆1.7Kb大肠杆菌噬菌体MS2的装配蛋白和壳蛋白基因以及SARS冠状病毒经过突变产生的270bp内对照片断,并将这些基因连接到载体pTrc99a上表达,进行纯化、定量分析、RT-PCR检测和稳定性试验。获得SARS内对照病毒样核蛋白颗粒,在人血清和SM缓冲液中37℃稳定性可达到30天,能抵抗核糖核酸酶降解。将内对照颗粒加入临床样本中一同检测,能够对检测的全过程(样品处理、反转录和PCR)有效进行监控,与SARS-CoV没有交叉反应。研究表明制备的该病毒样核蛋白颗粒稳定、安全、可靠,可作为SARS冠状病毒RT-PCR检测、定量分析的有效内对照参考品。 |
| 关 键 词： | SARS RT-PCR 病毒样颗粒 抗核糖核酸酶 内对照 |
| 文章编号： | 1001-5493(2006)01-0068-09 |
| 修稿时间： | 2005年6月23日 |
CONSTRUCTION AND EXPRESSION OF VIRUS-LIKE PARTICLES AS INTERNAL CONTROL RNA FOR SARS-CoV DETECTION |
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| LI Zhenyong,JING Jianzhou,LIU Mingxia,QU Lingbo,LI Zhitao,WANG Yunlong,ZHAO Yufen.CONSTRUCTION AND EXPRESSION OF VIRUS-LIKE PARTICLES AS INTERNAL CONTROL RNA FOR SARS-CoV DETECTION[J].Ion Exchange and Adsorption,2006,22(1):68-76. | |
| Authors: | LI Zhenyong JING Jianzhou LIU Mingxia QU Lingbo LI Zhitao WANG Yunlong ZHAO Yufen |
| Abstract: | |
| Keywords: | SARS RT-PCR Virus-like particles Resistant RNase Internal control |
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