基于荧光标记核酸探针及核酸染料SYBR GreenⅠ定量检测单链DNA |
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引用本文: | 郑爱华,朱庆,向东山,何治柯.基于荧光标记核酸探针及核酸染料SYBR GreenⅠ定量检测单链DNA[J].分析化学,2013(3):325-329. |
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作者姓名: | 郑爱华 朱庆 向东山 何治柯 |
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作者单位: | 湖北医药学院公共管理学院;武汉大学化学与分子科学学院生物医学分析化学教育部重点实验室 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(No.21075093)资助项目 |
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摘 要: | 建立了同步双色荧光定量检测单链DNA的方法。利用氧化石墨烯将荧光标记核酸探针的荧光猝灭,而当其与待测液中的目标DNA发生杂交反应,生成的双链DNA脱离氧化石墨烯而使得染料荧光得以恢复,同时生成的双链DNA与核酸染料SYBR GreenⅠ结合,使荧光增强。在优化条件下,目标DNA浓度在1×10"10~2×10"9mol/L范围内时,两种荧光染料的荧光强度之和与目标DNA的浓度之间具有良好的线性关系,拟合的回归方程为y=63.388x+9.3862,R2=0.9954,检出限为85 pmol/L。本方法灵敏度高、准确性及选择性好。
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关 键 词: | 氧化石墨烯 SYBR GreenⅠ 同步双色荧光谱 单链DNA 定量检测 |
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