| 丝胶蛋白源Tn和T抗原的释放制备及质谱分析 |
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| 引用本文： | 满丽娟,叶佳佳,张德锋,邹籽华,黄琳娟,王仲孚,王承健.丝胶蛋白源Tn和T抗原的释放制备及质谱分析[J].高等学校化学学报,2023(12):148-155. |
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| 作者姓名： | 满丽娟 叶佳佳 张德锋 邹籽华 黄琳娟 王仲孚 王承健 |
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| 作者单位： | 1. 陕西省天然多糖资源利用工程研究中心,西北大学食品科学与工程学院;2. 西北大学生命科学学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(批准号:31971215,31600647)资助~~； |
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| 摘 要： | 以蚕茧丝胶蛋白源Tn抗原和T抗原为研究对象,采用“一釜法”、氨水催化法和链霉蛋白酶E(Pronase E)水解法对丝胶蛋白O-糖链进行释放,并通过固相萃取柱进行分级纯化,以高效液相色谱仪(HPLC)进行分离制备;利用电喷雾质谱(ESI-MS)、串联质谱(MS/MS)及在线液相色谱-质谱联用仪(Online LC-MS)进行了结构鉴定和定量分析.结果表明,丝胶蛋白中O-GalNAc含量为1.58μg/g, O-GalNAcGal含量为0.54μg/g,二者丰度比约为5.3∶1;并且氨水可高效释放出其还原性O-连接单糖GalNAc,通过液相色谱法可实现其精细分离纯化,而以等量Pronase E对丝胶蛋白水解可有效释放出Tn抗原和T抗原.
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| 关 键 词： | Tn和T抗原 丝胶蛋白 O-糖链释放 高效液相色谱 质谱 |
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