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量子点与人源抗谷胱甘肽单链抗体的连接与表征
引用本文:徐俊杰,王诗雯,赵虹,陈桂秋,霍锐,田莉,段玉晶,李敏杰,杨柏,魏景艳. 量子点与人源抗谷胱甘肽单链抗体的连接与表征[J]. 高等学校化学学报, 2009, 30(3): 506-509
作者姓名:徐俊杰  王诗雯  赵虹  陈桂秋  霍锐  田莉  段玉晶  李敏杰  杨柏  魏景艳
作者单位:1. 吉林大学药学院,长春,130021
2. 吉林大学中日联谊医院中心实验室,长春,130031
3. 吉林大学中日联谊医院病理科,长春,130031
4. 吉林大学化学学院,超分子结构与材料国家重点实验室,长春,130012
5. 吉林大学药学院,长春,130021;吉林大学生命科学学院,分子酶学工程教育部重点实验室,长春,130021
基金项目:吉林省科学技术厅基金,中国博士后科学基金,吉林大学本科生创新性实验计划 
摘    要:用已构建的表达载体pPELB-B3, 在大肠杆菌Rosetta中可溶性表达人源抗谷胱甘肽(GSH)单链抗体B3(scFv-B3), 经Ni2+螯合亲和层析纯化后, 用点印迹法验证了其与GSH结合的特异性. 将水相合成的半导体纳米粒子(半导体量子点, QDs)在N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDC)的作用下, 与scFvs连接. 光谱分析和膜印迹结果表明, scFvs成功地共价连接到QDs表面, 所得的QD-scFvs复合物能够较好地识别GSH. 荧光显微镜观察QD-scFvs与人乳腺癌细胞MCF-7的作用结果, 初步判断QD-scFvs能够跨膜进入细胞.

关 键 词:量子点  人源单链抗体  谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)  共价结合  印迹
收稿时间:2008-06-20

Preparation and Characterization of Quantum Dots-anti-GSH Human scFvs Bioconjugations
XU Jun-Jie,WANG Shi-Wen,ZHAO Hong,CHEN Gui-Qiu,HUO Rui,TIAN Li,DUAN Yu-Jing,LI Min-Jie,YANG Bai,WEI Jing-Yan. Preparation and Characterization of Quantum Dots-anti-GSH Human scFvs Bioconjugations[J]. Chemical Research In Chinese Universities, 2009, 30(3): 506-509
Authors:XU Jun-Jie  WANG Shi-Wen  ZHAO Hong  CHEN Gui-Qiu  HUO Rui  TIAN Li  DUAN Yu-Jing  LI Min-Jie  YANG Bai  WEI Jing-Yan
Affiliation:College of Pharmaceutical Science, Key Laboratory for Molecular Enzymology and Engineering of Ministry of Education, College of Life Science, Jilin University, Changchun 130021, China; State Key Lab for Supramolecular Structure and Materials, College of Chemistry, Jilin University, Changchun 130012, China; Central Laboratory, Pathology Department, China-Japan Union Hospital, Jilin University, Changchun 130031, China
Abstract:In order to generate catalytic antibodies with glutathione peroxidase(GPX) activity,the clone B3 that bound specifically to glutathione(GSH) was selected from the phage display antibody library[human synthetic VH+VL single-chain Fv fragment(scFv) library] and the expression vector of scFv-B3 was constructed in previous study.The expression vector pPELB-B3 constructed was transformed into the Escherichia coli Rosetta to express the human anti-GSH single chain fragments variable(scFvs) antibodies.The scFv-B3 ...
Keywords:Quantum dot  Human single chain fragments variable(scFvs)  Glutathione peroxidase(GPX)  Covalent conjugation  ')"   href="  #"  > Dot blot
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