| 铜Ⅱ化合物水解肌红蛋白活性位点的质谱研究 |
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| 引用本文： | 张琳,温燕梅,谢建英.铜Ⅱ化合物水解肌红蛋白活性位点的质谱研究[J].分析化学,2009,37(9). |
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| 作者姓名： | 张琳 温燕梅 谢建英 |
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| 作者单位： | 广东海洋大学理学院,湛江,524088 |
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| 摘 要： | 以铜(Ⅱ)化合物为金属模拟酶,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳研究它们对肌红蛋白的水解作用,利用高效液相色谱-电喷雾质谱的测量方法替代传统的N端氨基酸序列分析结合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱或电喷雾质谱方法来检测得到的多肽片断分子量,据此确定水解反应的活性位点.结果得到分子量为10093.0,10388.0,6876.0和6581.0的4个片段,分别对应于Gly1-91,Gly1-Ala94,Ser92-Gly153和Thr95-Gly153, 表明Cu2+通过与肌红蛋白中His93的侧链配位,水解断裂位于其前后沿的第2个肽键,即:Gln91-Ser92和Ala94-Thr95,水解反应具有很高的选择性.位于His93前沿的活性位点特征与过去的研究结果一致,而His93后沿的活性位点,即His93-Ala94-Thr95序列中Thr95 N端是一个新位点.
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| 关 键 词： | 铜 肌红蛋白 高效液相色谱-电喷雾质谱联用 水解作用 |
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