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猪生殖与呼吸综合征病毒TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立
引用本文:宋志军,宋长绪,杨增岐,朱道中,武占银,蒋智勇,林志雄,刘燕玲,张福良. 猪生殖与呼吸综合征病毒TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立[J]. 计算力学学报, 2006, 0(2)
作者姓名:宋志军  宋长绪  杨增岐  朱道中  武占银  蒋智勇  林志雄  刘燕玲  张福良
作者单位:西北农林科技大学动物科技学院,广东省农业科学院兽医研究所,西北农林科技大学动物科技学院,广州出入境检验检疫局,宁夏动物防疫站,广东省农业科学院兽医研究所,广州出入境检验检疫局,广东省农业科学院兽医研究所,西北农林科技大学动物科技学院 陕西杨凌712100,广东省农业科学院兽医研究所,广东广州510640,广东广州510640,陕西杨凌712100,广东广州510623,宁夏银川750002,广东广州510640,广东广州510623,广东广州510640,陕西杨凌712100,广东省农业科学院兽医研究所,广东广州510640
基金项目:国家高技术研究发展计划(863)项目(2003AA241110),广东省自然科学基金项目(031990和04002083)
摘    要:根据GenBank登录的PRRSV保守基因序列设计合成了引物和探针,并对其进行了筛选;对荧光定量PCR的反应条件进行了优化,建立了TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法。同时用建立的检测方法对组织病料进行了检测,并与常规RT-PCR做了对比。结果显示,所建立的TaqMan荧光定量RT-PCR方法灵敏度可达5.0×100拷贝/μL,比常规RT-PCR灵敏度高100倍。用该方法对东莞、增城、湛江等地的猪血清和多种组织样品进行了检测。结果,该方法与常规RT-PCR检测方法的阳性符合率为100%。用该方法对3份不同的组织样品进行了重复检测,结果表明,该方法具有良好的重复性,可满足当前PRRS的诊断需要。

关 键 词:猪生殖与呼吸综合征病毒  实时定量RT-PCR  TaqMan荧光探针

Development of real-time TaqMan-quantitative RT-PCR assay for detection of porcine reproductive and respiratory syndrome virus
SONG Zhi-jun. Development of real-time TaqMan-quantitative RT-PCR assay for detection of porcine reproductive and respiratory syndrome virus[J]. Chinese Journal of Computational Mechanics, 2006, 0(2)
Authors:SONG Zhi-jun
Affiliation:SONG Zhi-jun~
Abstract:
Keywords:PRRSV  real-time quantitative RT-PCR  TaqMan fluorescence probe
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