荧光偏振免疫法测定水产品中的丁香酚

将丁香酚（Eul）与丙烯酸甲酯进行衍生化反应，合成了一种新型的丁香酚半抗原4-(4羟基-3-甲氨基苯基)-丁-2-烯酸（Eul-Aca）。采用活性酯法将丁香酚半抗原与乙二胺异硫氰酸荧光素（EDF）偶联，分别制备了同源和异源荧光示踪物。通过比较不同示踪物的抗体稀释度和灵敏度，优化反应时间等检测条件，建立了一种检测水产品中丁香酚的荧光偏振免疫分析法（FPIA）。结果表明：异源示踪物（Eul-AcaEDF）具有更优的检测灵敏度，抗体稀释度为1/200，反应时间仅需5 min。该方法的半抑制浓度（IC50）为11.2μg/L，检测线性范围为1.1～111.5μg/L，检出限（LOD）为0.24μg/L。实际样品中丁香酚的加标回收率为80.6%～107.4%，相对标准偏差（RSD）<15%。FPIA检测结果与气相色谱-质谱（GC-MS）法结果具有良好的一致性（r=0.993），适用于水产品中丁香酚的残留检测。