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用于细胞和组织中弗林蛋白酶特异性成像的双光子荧光探针研究
引用本文:刘红文,朱隆民,娄霄峰,袁林,张晓兵. 用于细胞和组织中弗林蛋白酶特异性成像的双光子荧光探针研究[J]. 化学学报, 2020, 78(11): 1240-1245. DOI: 10.6023/A20070323
作者姓名:刘红文  朱隆民  娄霄峰  袁林  张晓兵
作者单位:湖南大学化学化工学院 化学/生物传感与计量学国家重点实验室 分子科学与生物医学实验室 长沙 410082
基金项目:人力资源和社会保障部博士后创新人才支持计划;国家重点研发计划;国家自然科学基金
摘    要:弗林蛋白酶是前体蛋白转化酶家族中最具特色的酶之一,具有重要的生物学功能,其表达量水平与许多疾病有密切的关系,如癌症的发生和发展与弗林蛋白酶表达水平有着密切关联.目前文献中报道了一些单光子荧光探针用于弗林蛋白酶的检测,但这些探针不能应用于深层组织成像,且弗林蛋白酶在肿瘤发展过程的作用仍没有得到很好地研究.针对这些问题,本工作构建了一种新型双光子荧光探针Nap-F用于细胞和肿瘤组织内弗林蛋白酶的检测与双光子成像. Nap-F是由经典双光子荧光染料1,8-萘酰亚胺、弗林蛋白酶特异性多肽序列RVRR和自消除连接体整合而成.实验结果表明Nap-F对弗林蛋白酶具有很好的特异性,能够定量检测弗林蛋白酶的活性.在飞秒激光820nm激发下,Nap-F能有效降低生物背景,并提高组织穿透深度,适用于细胞和组织的双光子成像.Nap-F成功地实现了几种活细胞中弗林蛋白酶的双光子成像,揭示了癌细胞和表达缺陷细胞中弗林蛋白酶含量的差异.更重要的是,我们将该探针用于Co Cl2固定HIF-1构建的肿瘤细胞缺氧模型成像,实验结果表明弗林蛋白酶的表达与肿瘤细胞缺氧程度存在正相关性.

关 键 词:双光子  荧光探针  弗林蛋白酶  癌症  缺氧

A Two-Photon Fluorescent Probe for Specific Imaging of Furin Activity in Living Cells and Tissues
Liu Hongwen,Zhu Longmin,Lou Xiaofeng,Yuan Lin,Zhang Xiao-Bing. A Two-Photon Fluorescent Probe for Specific Imaging of Furin Activity in Living Cells and Tissues[J]. Acta Chimica Sinica, 2020, 78(11): 1240-1245. DOI: 10.6023/A20070323
Authors:Liu Hongwen  Zhu Longmin  Lou Xiaofeng  Yuan Lin  Zhang Xiao-Bing
Affiliation:Molecular Science and Biomedicine Laboratory(MBL), College of Chemistry and Chemical Engineering, State Key Laboratory of Chemo/Biosensing and Chemometrics, Hunan University, Changsha 410082, China
Abstract:
Keywords:two-photon  fluorescent probe  furin  cancer  hypoxia  
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