| 一种新型天蚕素杂合肽AD和aFGF突变体融合蛋白S的构建及表达 |
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| 引用本文： | 苏志坚,吴晓萍,郑青,黄亚东,庞实锋,冯雅,李校堃.一种新型天蚕素杂合肽AD和aFGF突变体融合蛋白S的构建及表达[J].暨南大学学报,2004,25(4):420-425. |
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| 作者姓名： | 苏志坚 吴晓萍 郑青 黄亚东 庞实锋 冯雅 李校堃 |
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| 作者单位： | 暨南大学药学院生物制药教研室;暨南大学医药生物技术研究开发中心,广东,广州,510632 |
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| 基金项目： | 国家十五“86 3”基金资助项目 (2002AA2Z3318,2 0 0 1AA2 15 131)，国家“973”基金资助项目 (G19990 5 4 2 0 4 ) |
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| 摘 要： | 目的：构建和表达一种带有凝血酶切割位点的天蚕素杂合肽AD和人酸性成纤维细胞生长因子(acidic fibroblast growth factor，aFGF)突变体的融合蛋白S，在创伤皮肤表面应用时能自动裂解成有抗感染功能的天蚕素杂合肽AD和皮肤修复功能的aFGF突变体。方法：利用P(R技术分别扩增出带有凝血酶切割位点的天蚕素杂合肽AD基因和aFGF突变体基因。再利用两作为模板，用PCR方法扩增出编码融合蛋白S的DNA。将该DNA片段插入到载体pPICZaA中，并利用电转法将质粒转入毕赤酵母smd1168中，Zeocin抗性筛选重组转化子。甲醇诱导72h，SDS-PAGE电泳检测融合蛋白S的表达，并用Western-blot杂交检测融合蛋白S的免疫原性。结果：筛选出的重组转化株在甲醇诱导后能表达相对分子质量约为19000的融合蛋白S，而该蛋白能与aFGF抗体产生免疫反应。结论：用PCR方法获得编码含凝血酶切割位点的天蚕素杂合肽AD和aFGF突变体的融合蛋白SDNA，并在毕赤酵母中实现了表达。
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| 关 键 词： | 天蚕素杂合肽AD aFGF突变体 融合蛋白S |
| 文章编号： | 1000-9965(2004)04-0420-06 |
| 修稿时间： | 2004年3月3日 |
Construction and expression of a new-type fusion proteins composed of cecropin AD and acidic fibroblast growth factor mutant in Pichia pastoris |
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| SU Zhi-jian,WU Xiao-ping,ZHENG Qing,HUANG Ya-dong,PANG Shi-feng,FENG Ya,LI Xiao-kun.Construction and expression of a new-type fusion proteins composed of cecropin AD and acidic fibroblast growth factor mutant in Pichia pastoris[J].Journal of Jinan University(Natural Science & Medicine Edition),2004,25(4):420-425. |
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| Authors: | SU Zhi-jian WU Xiao-ping ZHENG Qing HUANG Ya-dong PANG Shi-feng FENG Ya LI Xiao-kun |
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| Institution: | SU Zhi-jian~1,WU Xiao-ping~1,ZHENG Qing~1,HUANG Ya-dong~1,PANG Shi-feng~2,FENG Ya~2,LI Xiao-kun~ |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | cecropin AD acidic fibroblast growth factor mutant fusion protein S |
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